建立了不同鱼贝类肌肉组织中以氘代同位素为内标测定β2雌二醇残留量的气相色谱/质谱(GC/MS)方法。样品中加入内标β2雌二醇2D2和乙酸钠缓冲溶液匀质后,用乙腈超声提取,经过正己烷脱脂,C18固相萃取柱净化和柱前三甲基硅烷化后,进行GC/MS分析。根据β2雌二醇和内标衍生物保留时间、主要特征离子及其相对丰度和平均质谱图定性;选择离子监测(SIM)模式下,根据β2雌二醇和内标衍生物定量离子质量色谱图的峰面积比值,内标标准曲线法定量。实验结果表明,在0.005～0.25mg/L范围内,衍生物定量离子峰面积比值与β2雌二醇浓度呈现良好线性关系,相关系数为0.9995;方法定量检出限为0.2μg/kg。当添加水平为0.2～5.0μg/kg时,回收率为68.5%～100.1%,相对标准偏差为4.8%～10.1%。通过对市场上7种鱼贝类的检测,进一步证明该法可实现对样品进行灵敏、准确的定性定量分析。